ABSTRACT
The aim of this paper was to discover the prevalence and assemblages of Giardia intestinalis, harbored in sheep and cows on familiar farms from five states of the Mexican Republic. Stool samples from 265 sheep and 174 cows were analyzed by centrifugation and flotation in zinc sulfate to search for cysts and ova. The samples with Giardia cysts were processed in a Sheather solution in order to isolate them. Afterwards, cultures were established in TYI-S-33, each one of which was the Giardia DNA source. The DNA was obtained and used as a template to amplify a fragment of the glutamate dehydrogenase (gdh) enzyme. The 430 bp amplicons were restricted with Nla IV and Rsa I in order to identify the restriction fragments length polymorphisms (RFLP's) patterns. From the cyst analysis, Giardia cysts in nine cows (5.1%) and 30 sheep (11.3%) were found. Then 10 axenic cultures (5 from sheep and 5 from cows) were set up. From the RFLP's pattern it was found that one cow had assemblage (AI), another two had a mixture of assemblages (AI + BIII) and the other two had (E + BIII). In sheep, it was found that two sheep had assemblage (AI) and the other three had a mixture of assemblages (AI + BIII). This is the first report in which zoonotic assemblages (A-I and BIII) predominance in ruminants from five states of Mexico have been demonstrated. Therefore, it is necessary to carry out further studies aimed at discovering other Giardia genotypes and transmission patterns between animals and humans in Mexico.
Con el fin de determinar la frecuencia y genotipos de Giardia intestinalis en ovinos y bovinos de traspatio de algunos estados de la República Mexicana, en este trabajo se colectaron heces de 265 ovinos y 174 bovinos, para la búsqueda de Giardia mediante coproparasitoscópicos (CPS) de concentración flotación. De las muestras fecales que resultaron positivas se obtuvieron los quistes por el método de Sheather. Los quistes se desenquistaron in vitro y los trofozoítos se mantuvieron en cultivo TYI-S-33 axénico. El ADN de los trofozoítos se obtuvo mediante extracciones fenólicas y se amplificó un segmento de ≈ 430 pb del gen de la enzima glutamato deshidrogenasa (gdh) por medio de la reacción en cadena de la ADN polimerasa (PCR), el producto se restringió con las enzimas Nla IV y Rsa I y se obtuvieron los polimorfismos de los fragmentos de restricción (RFLP). En los CPS se encontró a Giardia en nueve bovinos (5.1%) y 30 ovinos (11.3%). Se establecieron 10 cultivos axénicos (5 de bovinos y 5 de ovinos). En un bovino se encontró el genotipo (AI), dos tuvieron mezcla de los genotipos (AI + BIII) y los otros dos fueron (E + BIII). Un ovino fue genotipo (AI) y tres tuvieron mezcla de los genotipos (AI + BIII). Éste es el primer informe que presenta predominio de genotipos zoonóticos (AI y BIII) en ovinos y bovinos de México. Es necesario investigar los genotipos de Giardia y patrones de transmisión entre animales y humanos en México.
ABSTRACT
Compound alpha (Ca) is a benzimidazolic derívate which has shown a high fasciolicidal efficacy when it is given by oral via. Solubilization of Ca would be a suitable alternative to obtain an injectable formulation. The objectives of the present study were to evaluate the solubility of Ca in order to determine the in vitro fasciolicidal efficacy and experimentally on infected ovines. The assays of solubility quantified by high-performance liquid chromatography (HPLC), showed that beta-cyclodextrin (β-CD) and hydroxi-propylbeta-cyclodextrin (HP-β-CD) solubilized in 0.015% and 1.018% respectively. The solubilization for HP-β-CD was calculated as 3.95% for 5.8 mg; 10.76% for HP-β-CD with methanol, 39.048% for proylene-glycol (PG), 100% for glycerol formal (GF), and 100% for combined PG and GF and water in proportions of 3:2:5 and 3:2:4. In vitro evaluation using immature F. hepatica showed that Ca induced 100% efficacy 24 hours after solubilization with either GF or GF combined with PG and water. The efficacy in sheep was 56.4 and 68.4% at 1 and 2 mg/kg respectively; whereas 1 mg/kg of sulphoxide metabolite induced an efficacy of 73.9%. The HPLC assays performed showed no evidence of the sulphoxide and sulphone metabolites. It is concluded that besides solubility and high in vitro fasciolicidal efficacy, the in vivo results in sheep showed only a moderate efficacy.
El compuesto alfa es un derivado bencimidazólico de gran eficacia fasciolicida, que se ingiere vía oral, su solubilización constituye una alternativa para obtener una formulación inyectable. Los objetivos de este estudio fueron: evaluar la solubilidad del compuesto alfa, determinar la eficacia fasciolicida in vitro y en ovinos experimentalmente infectados. Los ensayos de solubilidad que fueron cuantificados mediante cromatografía de líquidos de alta resolución, mostraron que la betaciclodextrina e hidroxipropil-betaciclodextrina solubilizaron en 0.051% y 1.018%. Esta última se evaluó con cinco concentraciones, mostró que a 5.8 mg la solubilidad fue 3.95%; hidroxipropil-betaciclodextrina y metanol, 10.76%; propilén-glicol, 39.048%; glicerol formal, 100%; y glicerol formal con propilén-glicol y agua en proporciones 3:2:5 y 3:2:4, 100%. La evaluación in vitro con fasciolas inmaduras mostró que el compuesto con glicerol formal y la combinación de vehículos a las 24 horas fueron eficaces en 100%. La eficacia in vivo en ovinos mostró que el compuesto alfa a dosis de 1 mg/kg fue de 56.46%, a 2 mg/kg de 68.4% y con sulfóxido del compuesto alfa a 1 mg/kg de 73.9%. No se encontró el compuesto alfa ni sus metabolitos sulfóxido y sulfona en el suero determinado por medio del cromatógrafo de líquidos de alta resolución. Se concluye que a pesar de obtener solubilidad del compuesto alfa y alta eficacia fasciolicida in vitro, los resultados in vivo en ovinos revelaron eficacia moderada.
ABSTRACT
El presente trabajo se llevó a cabo con el fin de conocer la edad de máxima eliminación de ooquistes y encontrar la relación de las cantidades eliminadas con la humedad relativa ambiental, además de determinar las especies de Eimeria y su frecuencia durante ocho ciclos productivos de pollos de engorda criados en granjas comerciales bajo condiciones normales de manejo y uso de anticoccidianos, de la zona avícola de Tehuacán, Puebla, México. Se estudiaron muestras de heces frescas de casetas representativas de siete granjas de la zona, muestreadas simultáneamente de la segunda a la séptima semanas de edad. Se cuantificaron e identificaron los ooquistes de las muestras positivas utilizando las técnicas de flotación y McMaster. Se encontró que la edad promedio de máxima eliminación de ooquistes en los pollos de las granjas fue de 40 días. Se observó una relación directa entre los ciclos productivos con más alta eliminación de ooquistes y la mayor humedad relativa ambiental. La frecuencia general promedio de las especies de Eimeria de la zona fue: E .tenella, 40 por ciento; E. Brunetti, 25.6 por ciento; E. Máxima, 20.6 por ciento; y E. Acervulina, 13.8 por ciento. Sin embargo, la frecuencia varió en las granjas estudiadas, en tres hubo un predominio de E. tenella, en dos de E. brunetti, en una de E. maxima y en otra se observó la combinación de E. tenella, E. brunetti y E. maxima.
Subject(s)
Animals , Chickens , Eimeria , PoultryABSTRACT
Con el objetivo de evaluar dos modelos de control quimioterapéutico contra Fasciola hepatica, en ganado bovino infectado de manera natural y localizado en una finca en el municipio de Nautla, Veracruz, México, se aplicó el triclabendazol (tbz) en una o dos ocasiones, en diferentes meses, para reducir al máximo la eliminación de huevos. Además, se determinaron los valores de anticuerpos anti-F. hepatica y los niveles séricos de gamma-glutamil transpeptidasa (ggt) y aspartato aminotransferasa (ast). Se trataron dos grupos (G) de 23 animales cada uno, con dosis de 12 mg/kg de tbz, el G-1, testigo, en enero y el G-2 en enero y mayo. Cada 45 días, durante 10 ocasiones, se recolectaron muestras de heces de todos los animales, para realizar el recuento de huevos en 5 g (hpg). Al mismo tiempo, se tomaron muestras de sangre de 15 vacas de cada grupo, con el fin de detectar en el suero, mediante ELISA, los anticuerpos anti-F. hepatica, así como valorar los niveles de ggt y ast por espectometría. El porcentaje de reducción de tasa de la media de hpg fue 27.6 más alto en el G-2 que en el G-1, lo que concuerda con los valores más bajos de ggt detectados en el G-2. Los valores medios de la ast no rebasaron el límite normal. Los niveles de anticuerpos fueron positivos y no parecen verse afectados por el tratamiento con tbz en ninguno de los grupos.
Subject(s)
Animals , Cattle , Cattle , Enzyme-Linked Immunosorbent Assay , Fasciola hepatica , gamma-Glutamyltransferase , Aspartate Aminotransferases , Antiparasitic AgentsABSTRACT
El objetivo del presente estudio fue evaluar la eficacia fasciolicida del 6-cloro-2- metiltio-5-(1-naftiloxi) bencimidazol denominado compuesto "alfa" contra fasciolas de cuatro y 10 semanas de edad en bovinos. Se utilizaron 15 novillos libres de infección por F. Hepática que se infectaron por vía oral con 300 metacercarias, administradas 150 en el día 0 y 150 en el día 45, respectivamente. A todos los bovinos se les tomaron muestras de heces con el propósito de corroborar la presencia del parásito mediante análisis coprológicos. El día 75, los grupos 1 y 2 fueron tratados con los compuestos alfa y triclabendazol a dosis única de 12 mg/kg, vía oral. El grupo 3 quedó como testigo sin tratamiento. A los 45 días postratamiento todos los bovinos fueron sacrificados para separar el hígado y cuantificar los vermes presentes. La eficacia se midió con base en el número de fasciolas presentes en los grupos tratados respecto del testigo. Los resultados indicaron una eficacia de 99.4 por ciento para el compuesto alfa y de 100 por ciento para el triclabendazol. Se concluye que el compuesto alfa mostró alta eficacia contra fasciolas de cuatro y 10 semanas de edad.
Subject(s)
Animals , Cattle , Benzimidazoles , Cattle , Fasciola hepatica , FascioliasisABSTRACT
El objetivo del presente estudio fue seleccionar entre cuatro vehículos, el idóneo para formular un fasciolicida experimental denominado Alfa. Se utilizaron 25 ovinos criollos, libres de infección por F. hepatica, los cuales en el día 0, fueron infectados por vía oral con 200 metacercarias del parásito por borrego, administradas en cápsula de gelatina. En la semana 6, sólo 15 ovinos fueron reinfectados con otras 200 metacercarias por animal. Diez semanas después de la primera infección, los borregos fueron divididos en cinco grupos de cinco animales cada uno, previendo que de los 15 ovinos reinfectados, 10 quedaran insertos en los grupos 1 y 2, y los 5 restantes quedaran dentro del grupo testigo. Así, los grupos 1 al 4 fueron dosificados por vía oral, con 15 mg/kg del compuesto experimental, formulado con los vehículos 1, 2, 3 y 4, respectivamente, y el grupo 5 fungió como testigo, sin tratamiento. A las dos semanas postratamiento, se sacrificaron los ovinos y se cuantificaron las fasciolas en hígado. La eficacia se determinó con base en el porcentaje de reducción de fasciolas. Los resultados indicaron una eficacia contra fasciolas adultas, de 100 por ciento, 100 por ciento, 92.4 por ciento y 77.0 por ciento, para los grupos 1, 2, 3 y 4, respectivamente, y contra fasciolas juveniles de 100 por ciento y 100 por ciento, para los grupos 1 y 2, respectivamente. Se concluye que el compuesto Alfa formulado con los vehículos 1 y 2, mostró una eficacia del 100 por ciento contra fasciolas de 4 y 10 semanas de edad en ovinos, respectivamente.
Subject(s)
Animals , Pharmaceutical Vehicles , Sheep , Drug Therapy , Fascioliasis , Research Design , Fasciola hepatica , Animal DiseasesABSTRACT
El objetivo fue determinar la prevalencia, la intensidad en la excreción de huevos y los títulos de anticuerpos anti-Fasciola hepatica expresados en densidades ópticas, en ganado vacuno tratado con triclabendazol cada 56 y 112 días durante 7 meses. Se utilizaron 42 bovinos divididos en tres grupos de 14 animales cada uno. El grupo A fue tratado con triclabendazol cada 56 días, el B cada 12, el C fue el testigo. Se emplearon las técnicas de sedimentación y Elisa. En el grupo A el número de animales positivos se redujo del 100 por ciento (día 0) a 0 por ciento (día 168). La media de huevos se redujo de 86.57 ñ 10.5 (día 0), a 0 (día 168). En el grupo B el número de animales positivos se redujo de 100 por ciento (día 0) a 14.28 por ciento (día 168), y la media de huevos de 82.85 ñ 14 (día 0) a 0.85 ñ 0.5 (día 168). En el grupo C la prevalencia siempre fue de 100 por ciento y la media de huevos excretados fluctuó de 68.14 a 78.85 durante el estudio. Entre el grupo A y el B se observaron diferencia estadísticas (P ó 0.05) en los días 84 y 112, 140 y 168 y siempre hubo diferencias con el grupo C (P ó 0.01) después del tratamiento. Las densidades ópticas se encontraron por debajo de 0.679 nm. No se encontraron diferencias estadísticas (P = 0.05) en el mismo grupo ni entre los tres grupos. La correlación entre títulos de anticuerpo y la excreción de huevos fue baja (0.26, 0.0022 y 0.011) para los grupos A, B, y C, respectivamente. Se concluye que el tratamiento con triclabendazol en ganado vacuno, aplicado cada 56 días, reduce significativamente (Pó 0.05) la excreción de huevos de F. Hepatica en comparación con el aplicado cada 112 días, y la correlación entre la cantidad de huevos y los títulos de anticuerpos expresados en densidades ópticas fueron bajas
Subject(s)
Animals , Cattle , Antibodies, Helminth , Cattle Diseases/parasitology , Fasciola hepatica/drug effects , Anthelmintics/administration & dosage , Anthelmintics/pharmacokinetics , Parasite Egg Count , MexicoABSTRACT
Se evaluó la eficacia fascioliscida del 6-cloro-5-(1-naphtoxy)-2-methyltiobencimidazol, denominado compuesto alfa, y del 6-cloro-5-(2-naphtoxy)-2-methyltiobencimidazol, denominado beta, bajo condiciones in vitro e in vivo. Para ambos compuestos la eficacia in vitro se evaluó a concentraciones de 50, 10, 3.33, 1.11 y 0.37 mg/L, utilizando metacercarias de Fasciola hepática desenquistadas. La eficacia se determinó con base en la sobrevivencia de estos cuatro días posexposición a los químicos. El compuesto alfa mostró una eficacia de 100 por ciento, 100 por ciento, 77.5 por ciento, 0.0 por ciento y 0.0 por ciento y el compuesto beta de 100 por ciento, 67.5 por ciento, 1.75 por ciento, 0.0 por ciento y 0.0 por ciento, respectivamente. Para la evaluación in vivo, se utilizaron 45 ovinos criollos, los cuales fueron infectados cada uno con 150 metacercarias de Fasciola hepática. Dos meses después, cuando todos lo ovinos se diagnosticaron positivios a los huevos del parásito mediante la prueba de sedimentación, los borregos se subdividieron en 5 grupos de 9 animales cada uno. Los grupos 1 y 2 fueron tratados con 10 y 15 mg/kg/vía oral del producto alfa, respectivamente. Los grupos 3 y 4 fueron dosificados con 10 y 15 mg/kg/vía oral del compuesto beta, respectivamente. El grupo 5 fungió como testigo sin tratamiento. Quince días posteriores al tratamiento, los ovinos se sacrificaron para colectar y cuantificar las fasciolas en el hígado. La eficacia fue determinada como porcentaje de reducción de fasciolas en los grupos tratados con respecto al testigo. Los resultados indicaron una eficacia de 80.6 y 86.9 por ciento para los grupos 1 y 2, respectivamente, y de 0.0 por ciento para los grupos 3 y 4, respectivamente. Mediciones de la longitud de fasciolas y peso del hígado, no mostraron algún efecto adverso atribuible a los tratamientos. Se concluye que el compuesto alfa bajo condiciones in vitro e in vivo, mostró una eficacia fasciolicida altamente promisoria y el compuesto beta solamente eficacia aceptable en el escrutinio in vitro
Subject(s)
Animals , Parasitic Diseases/drug therapy , Sheep/parasitology , Fasciola hepatica/drug effects , Fasciola hepatica/parasitology , In Vitro TechniquesABSTRACT
Se evaluó la actividad fasciolicida del 6-cloro-5-(l-naphtoxy)-2-methyltiobencimidazol, denominado compuesto alfa, contra fasciolas de 4 y 8 semanas de edad en ovinos. Se utilizaron 50 ovinos criollos, los cuales se infectaron oralmente con 200 metacercarias de F. hepática. Cuatro semanas después de la infección, todos los ovinos fueron reinfectados cada uno con otras 200 metacercarias. Ocho semanas después a la infección inicial, cuando todos los animales estaban positivos a huevos del parásito, fueron divididos al azar en 5 grupos de 10 animales cada uno. Los grupos 1 al 4, fueron tratados oralmente con el compuesto a una dosis de 10, 15, 22.2 y 30 mg/kg de peso corporal, respectivamente. El grupo 5 permaneció como testigo sin tratamiento. Dos días después del tratamiento, todos los ovinos fueron sacrificados con el fin de colectar y contar las fasciolas presentes en el hígado. La eficacia se determinó como porcentaje de reducción de fasciolas en los grupos tratados, en comparación con el testigo. Los reusltados mostraron que a dosis de 10, 15, 22.2 y 30 mg/kg de peso vivo, el compuesto alfa removió fasciolas de 4 semanas de edad en un 82.2 por ciento, 87.2 por ciento, 90.8 por ciento y 94.3 por ciento y fasciolas de 8 semanas en 81.7 por ciento, 88.1 por ciento, 87.2 por ciento y 90.0 por ciento, respectivamente. La eficacia promedio para ambos estadios de 4 y 8 semanas fue de 82.0 por ciento, 87.6 por ciento, 89.2 y 92.4 por ciento, para las respectivas concentraciones concluye que la eficacia fasciolicida, conferida por el compuesto alfa a las dosis administradas, fue moderadamente aceptable, siendo las dosis de 15 mg/kg la más idónea
Subject(s)
Animals , Sheep/parasitology , Treatment Outcome , Fasciola hepatica/drug effects , Anthelmintics/therapeutic use , Experiment of SubstancesABSTRACT
Los objetivos del presente estudio fueron: Determinar la sensibilidad y especificidad de DIG-ELISA y establecer el valor de corte para realizar diagnóstico de fasciolosis bovina; determinar la capacidad diagnóstica de la prueba en bovinos infectados en forma experimental; valorar la seroprevalencia bimensual y durante un año de los títulos IgG anti-Fasciola hepatica en suero de bovinos infectados en forma natural; y comparar la variación con la presencia de huevos del trematodo identificados en el análisis coproparasitoscópico. Con el propósito de estandarizar la prueba, además de las correspondientes titulaciones de sueros, antígeno y conjugado, se utilizaron 80 sueros de bovinos, de estos últimos 40 pertenecían a animales provenientes del estado de Sonora (zona libre de fasciolosis) y 40 del estado de Hidalgo (zona enzoótica de fasciolosis). La prueba mostró una sensibilidad de 97.5 por ciento y una especificidad de 80.0 por ciento, obteniendo un valor de corte de 7 mm. En otro estudio, se infectaron 15 bovinos jóvenes de sexo indistinto, cada uno con 600 metacercarias del Fasciola hepatica. Los animales fueron sangrados semanalmente y durante 14 ocasiones para obtención de suero. La prueba fue capaz de detectar anticuerpos anti-F. Hepatica desde la segunda semana posinfección, logrando sus mayores incrementos expresados en diámetro de la zona de reacción (DZR) entre la séptima y décima semanas. En otro experimentos se utilizaron 85 bovinos criollos, hembras, de un rancho ubicado en un área enzoótica de fasciolosis en Nautla, Veracruz, en donde se colectó sangre para obtención de suero, así como heces de cada uno de los bovinos. Los animales fueron muestreados bimensualmente y durante un año para correr los cueros con DIG-ELISA y las heces para realizar análisis por sedimentación. Los porcentajes de seroprevalencia fueron del 58 por ciento, 73 por ciento, 80 por ciento, 100 por ciento, 96 por ciento y 79 por ciento para los meses de marzo, mayo, julio, septiembre, enero y marzo, respectivamente, mostrando porcentajes de positividad similares a aquellos obtenidos en el análisis coproparasitoscópico (P>0.01). Se concluye que DIG-ELISA mostró alta sensibilidad y fácil montaje para utilizarse bajo condiciones de campo en el diagnóstico temprano de fasciolisis bovina, generando resultados reproducibles que pueden ser de gran utilidad para estudios seroepidemiológicos
Subject(s)
Animals , Cattle , Cattle/immunology , Cattle/parasitology , Cattle/blood , Enzyme-Linked Immunosorbent Assay , Epidemiology , Fasciola hepatica/parasitology , Fascioliasis/diagnosis , Fascioliasis/blood , Serologic TestsABSTRACT
Se determinaron los niveles séricos de gammaglutamil transpoptidasa (GGT) en ganado ovino infectado experimentalmente con Fasciola hepatica, con el objetivo de valorar el tiempo en que se normalizan después del tratamiento con triclabendazol. Se empleó un lote de corderos adultos y se conformaron 3 lotes de 5 animales cada uno. Los lotes 1 y 2 fueron infectados con 60 metacarcarias de Fasciola hepatica, los días 1, 30 y 75 del experimento. A los 90 días de la infección, se trató el lote 1 con triclabendazol a una dosis de 10 mg/kg; el lote 3 no fue infectado ni tratado, fue el testigo negativo. Los niveles séricos de GGT fueron cuantificados 8 días antes de la infección y posteriormente cada 30 días durante 165. Se encontró un incremento significativo (P< 0.05) de GGT en los lotes 1 y 2 en relación con el 3 posinfección, con una x de 35.4 y de 44.7 UY, y un pico a los 90 días con una x de 71.7 y 57.3 unidades internacionales, respectivamante. Los niveles séricos de GGT se normalizaron en los ovinos a los 75 días de haber sido tratados con triclabendazol
Subject(s)
Animals , Thiabendazole/analogs & derivatives , Sheep/parasitology , Fasciola hepatica/parasitology , gamma-Glutamyltransferase/biosynthesis , Anthelmintics/pharmacology , Liver Diseases, Parasitic/chemically induced , Liver Diseases, Parasitic/veterinaryABSTRACT
Se evaluó la eficacia fasciolicida del 2-amino-5 (6)-cloro-1-metoxicarbonil bencimidazol denominado compuesto "A", contra fasciolas de cuatro y ocho semanas de edad en ganado ovino. Se utilzaron 20 ovinos machos criollos, entre 8 y 12 meses de edad, los cuales fueron infectados por vía oral con 150 metacercarias de F. hepatica por animal. En la semana cuatro, todos los animales fueron rinfectados con 150 metacercarias más. Ocho semanas después, lo ovinos positivos a eliminación de huevos del parásito, fueron divididos al azar en 4 grupos de 5 animales cada uno. Los grupos 1, 2 y 3 se trataron con el compuesto "A" por vía oral con 5, 10 y 15 mg/kg de peso, respectivamante. El grupo 4 fue testigo sin tratamiento. A las dos semanas posteriormente, los ovinos se sacrificaron y se cuantificaron las fasciolas en hígado. La eficacia se determinó con base en el porcentaje de reducción de fasciolas. Los resultados mostraron que a las dosis de 5, 10 y 15 mg/kg de peso vivo, el compuesto "A" removió fasciolas de cuatro semanas de edad, en 58.6 por ciento, 66.0 por ciento y 66.0 por ciento y fasciolas de ocho semanas en 24.8 por ciento, 46.0 por ciento y 62.2 por ciento, respectivamante, generando un porcentaje global de eficacia de 35.7, 52.4 por ciento y 63.4 por ciento, respectivamante. Se concluye que la eficacia conferida por el compuesto "A" no es aceptable en términos de eficiencia fasciolicida